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仪器之家 2020-09-16 11:33 王斐素

氨基酸序列会因为选择的树脂不同而不一样,因此在切割时候,也需要选择不完全相同的切割方法。通常选择的切割条件为酸性环境。通常采用HF切割PAM,MBHA树脂,在切割过程中需要将苯甲醚,对巯基苯酚,对甲苯酚等试剂加入其中。通常采用TFA切割Wang,Rink-Amide,Trt树脂,在切割过程中将三异丙基硅烷,苯酚,乙二硫醇,苯甲硫醚,水等加入。这些添加试剂主要作为碳正离子俘获试剂使用,以对切割反应过程中生成的碳正离子进行俘获为目的,从而使这些碳正离子对部分氨基酸侧链的进攻导致的副反应得以减少。Trp,Tyr为比较容易产生副反应的氨基酸,反应通常,是在室温条件下2h-4h,TFA/TIS/EDT/H2O(94/1/2.5/2.5),HF/p-cresol/p-thiocresol(90/5/5)为常用的切割配比,10-15ml/g树脂为通常的切割试剂用量。11、在反应混合物中加入等体积的2×SDS样品缓冲液,在100摄氏度中煮沸5分钟。

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