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仪器之家 2020-07-26 12:02 刘运

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1、转膜时,1张5.5×8.5cm的PVDF膜以及2张6.5×10cm的滤纸需要被准备,由于膜会受到手上的蛋白的污染,必须要戴手套切滤纸和膜。在甲醇中浸没切好的PVDF膜超过15秒即可。可反转的染料终止法是由Solexa开发出来的。首先在与固体介质(如玻璃板)交联的引物上连接DNA模板,并且扩增使得本地微克隆形成。往体系中依次添加四种ddNTPs,在下一种核苷酸添加之前会将未结合的ddNTPs冲洗走,这种方法不同于454的焦磷酸测序,一次只对一个碱基进行延伸。

碱基,核糖或脱氧核糖和磷酸由核酸在强酸和高温下完全水解而获得。在浓度略稀的的无机酸中,会选择性的断裂最易水解的化学键,此键通常是连接嘌呤和核糖的糖苷,从而使脱嘌呤核酸产生。

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